1、首先，開機。將產品接入220V交流電源，大約等待5分鐘后鈉光燈正常發光，就可正式開始測定作業。

　　2、其次，檢查旋光儀零位是否調制準確。并且觀察旋光儀在未放試管或放進充滿蒸餾水的試管時，零度時的亮度是否一致。當不一致，說明有該儀器有零位誤差，應在測量讀數中減去或加上該偏差值。

　　3、然后，就是測定并記錄旋光的讀數。讀數是正數的為右旋物質，反之為左旋物質。注意的是如采用到雙游標讀數法，需按產品說明書中給定的項目公式進行計算。

　　4、接著，試管調試。選取長度與玻璃壁相適應的試管，注滿待測試液，給試管裝上橡皮圈，旋上螺帽，直至不漏水為止。試管兩頭的殘余溶液要保持干燥狀態，以免影響觀察清晰度及測定精度。注意螺帽不需要旋得太緊，不然護片玻璃會有向外作用力，影響讀數正確性。

　　5、旋光度和溫度之間的關系需要注意。對大多數物質，用λ=5893A°(鈉光)測定，一般情況下，每當溫度升高1℃時，旋光度約減少0.3%。而對于要求較高的測定工作，需要在20℃±2℃的條件下進行。